Kidney Int ：近端生物钟调节功能障碍导致糖尿病患者肾糖异生增强和加重高血糖

剧中及最终目标：在哮喘患者中都，十二指肠通过提高原胃中都的重吸收和上调锁骨小管中都的代谢来促进哮喘高鲜皮质醇的时有发生。然而，鲜皮质醇技术水平的慢性升高意味著反过来引致哮喘病变(DN)，这是哮喘最致使的并发症之一，其外观上是肾小球、肾小管和十二指肠鲜血管受损。虽然代谢凋亡是哮喘病变时有发生和发展的主要因素所，但在大多数哮喘患者中都，高鲜皮质醇本身并不会引致肾功能不全。这表明，合并症或环境、遗传或表观遗传的转变意味著是启动和/或加速实质性DN所所需的。心率是一种普遍存在的分子计分的系统，它将蛋白、组织和系统的生物功能与24同一时间的环境周期同步。局部心率驱动蛋白类改进型和组织特有的生理，它们的失调与一系列疾病的复发和/或实质性有关。然而，哮喘患者十二指肠中都内在心率的病理学生理作用仍不清楚。

方律：为了解决这个问题，我们用碱基苯基良抗生素诱导了头蛋白(cKOp大鼠)或肾小管(cKOt大鼠)中都缺乏昼夜生理转录调节表征BMAL1的大鼠患I改进型哮喘。

大鼠模改进型提纯：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1大鼠(cKOp大鼠)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1大鼠(cKOt大鼠)经DOX(饮水中都2 mg/ml)处置2周后，Bmal1(ARNTL)基因失活。他们的对照组(Bmal1lox/lox大鼠)不能接受完全一致的DOX疗程。在DOX疗程结束一周后，通过肺部麻醉碱基苯基良抗生素(STZ，50 mg/kg增重，每日5天)诱导I改进型哮喘。溶媒处置的大鼠不能接受PBS的溶媒麻醉。所有实验均在最后一次麻醉STZ或溶媒8周后展开。在所有实验中都，从ZT9诛杀的大鼠额头采集组织和鲜血清(ZT-Zeitgeber时长单位；ZT0是开灯时长，ZT12是关灯时长)。

代谢捕虫：大鼠被饲养在个体代谢脑袋中都(Tecniplast，律国)。在4天的适应期后展开24同一时间的胃液查阅。

鲜血红蛋白和胃液生化检测：用Vaudois中都心医院临床实验室(LCC)检测胃和鲜血红蛋白Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、胃酸和胃素分子量及氯化钠。用电解质皓(Metrohm)检测胃液pH倍数。使用EPOC鲜血清研究皓(摩托罗拉医疗)量度动-腹腔混杂鲜血的鲜血清pH倍数和鲜血气。胃铵检测选用Berthelot律。胃可溶液酸检测选用Chan25方律。选用放射免疫律(DPC)检测鲜血红蛋白儿茶酚胺技术水平。用Mercodia公司的试剂盒检测鲜血红蛋白胰岛素。

耐量飞行测试(GTT)：洗手15同一时间后，给空白对照组和cKOt大鼠肺部麻醉(1g/kg增重)。分别于麻醉之前(t=0)、麻醉后15、30、60、90、120、180min，用鲜皮质醇测出皓检测鲜皮质醇。

胰岛素耐量飞行测试(ITT)：洗手4h后，给对照组和cKOt大鼠肺部麻醉0.5U/kg增重的重组人胰岛素(人重组胰岛素，Sigma)。分别于胰岛素麻醉之前(t=0)、胰岛素麻醉后15、30、45、60、90、120、150、180min检测鲜皮质醇。如果鲜皮质醇调低2 mm以下，则通过肺部麻醉30毫克拯救大鼠，并将其排除在研究基本上。

RNA人类基因组计划技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus中都的描述展开。使用GRCm38.92基因注释。使用TMM归一化对基因个数展开定标，并使用LIMMA R打包27中都的“CPM”函数将其对数转换为每百万个数(CPM)。计算了KO和Ctrl食肉动物在未处置(PBS)和处置(STZ)条件下的差异性表述以及反之亦然的粒子。对于这三种更为中都的每一种，选择FDR

结果：在脑癌哮喘的cKOp和cKOt大鼠中都，心率外周与哮喘病变的时有发生没相关性。然而，与碱基苯基良抗生素疗程的对照组相比，脑癌哮喘的cKOt大鼠表现出加高鲜皮质醇加重，胃中都排出提高，多胃提高，十二指肠粗壮愈来愈引人注意。mRNA和蛋白表述研究显示，与哮喘对照组大鼠相比，cKOt哮喘大鼠十二指肠中都的代谢所需显著大幅提高。CKOt哮喘大鼠的转录研究和功能研究确定了直接或间接影响代谢所需的多种的系统的转变。

正确性：我们证明了内在肾小管心率外周可通过大幅提高肾锁骨小管的代谢而加重哮喘高鲜皮质醇，进一步凸显了心率调节在哮喘患者中都的益处。

注解来历：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24